Актуальність. Епіхлоргідрин є складовою частиною багатьох хімічних сполук [1]. Випаровування епіхлоргідрина здатні адсорбуватись в легенях і потрапляти в кров, де негативно впливає на кислотну резистентність еритроцитів [2] і активує перекісне окислення ліпідів [3]. Антиоксидантний захист забезпечують ферменти каталаза і супероксиддисмутаза: каталаза інактивує перекіс водню, а супероксиддисмутаза нейтралізує супероксид-аніон, які утворюються під час перекісного окислювання ліпідів [4]. Еритроцити являють собою високо спеціалізовані клітини, вони не мають ядра, тобто не мають генетичного апарату, який забезпечує синтез ферментів, коли в цьому є потреба. Тому в зрілих еритроцитах набір ферментів має відповідну вихідну концентрацію, яка в продовж існування еритроцитів не поповнюється. Екзогенні хімічні фактори можуть негативно впливати на стан клітинної мембрани еритроцитів, підвищуючи її проникність, що може тягнути за собою вихід ферментів з еритроцитів. В такому разі активність ферментів антиоксидантного захисту в середовищі культивування еритроцитів буде наявною.
Мета дослідження – визначити вплив епіхлоргідрина на ферментативну систему антиоксидантного захисту еритроцитів в умовах in vitro.
Матеріали і методи. Матеріалом дослідження була кров людини, яку отримували з кубітальної вени. Гепаринізовані 5 мл крові вносили в 10 мл середовища 199 з солями Хенкса (рН 7,0-7,4 умовних одиниць), через які продували пари епіхлоргідрину в концентрації 50 мг/м3, (це складає 1 ГДК – гранично допустиму концентрацію) протягом 1 години. Після цього суспензію еритроцитів центрифугували 10 хвилин при 1000 обертів/на хвилину. Надосадову рідину відбирали і використовували для виміру активності каталази і супероксиддисмутази. Контроль складала надосадова рідина суспензії еритроцитів, через яку пари епіхлоргідрину не продувались. Активність каталази вимірювали спектрофотометрично за Королюк М. А. і співавт. (1988), реакцію зупиняли 4% розчином молібдату амонію. Активність супероксиддисмутази визначали за Чиварі С. і співавт. (1985) спектрофотометричним методом при довжині хвилі 540 нм проти контрольної проби Про активність ферменту свідчила його здатність інгібувати відновлення нітротетразолію синього за присутності НАДН. Кількість ферменту, здатного інгібувати відновлення нітротетразолію синього на 50%, брали за одну умовну одиницю активності. Статистичну обробку отриманих даних проводили параметричними методами.
Результати і їх обговорення. Проведено 17 експериментів in vitro з визначення впливу епіхлоргідрину на еритроцити людини. В надосадових рідинах контролів (еритроцити, які не підпадали під дію епіхлоргідрину) активності каталази і супероксиддисмутази не зареєстровано. Після взаємодії суспензій еритроцитів з епіхлоргідрину впродовж 1 години в надосадових рідинах з’являлась активність каталази в діапазоні 7-13 умовних одиниць (в середньому – 9,6±0,5), активність супероксиддисмутази збільшувалась в діапазоні 4-11 умовних одиниць (в середньому – 7,4±0,3). Отримані результати свідчать про те, що епіхлоргідрин при контакті з еритроцитами негативно впливає на стан їх мембран, що супроводжується виходом каталази і супероксиддисмутази з еритроцитів. Внаслідок цього антиоксидантний потенціал ферментативної системи антиоксидантного захисту зменшується.
Висновок. Контакт еритроцитів з епіхлоргідрином в діючій концентрації 50 мг/м3 і протягом 1 години в умовах in vitro викликає вихід з еритроцитів каталази і супероксиддисмутази – ферментів системи антиоксидантного захисту. Втрата еритроцитами каталази і супероксиддисмутази зменшує потенціал системи антиоксидантного захисту еритроцитів
Література
1. Jia L., Yan L., Ying L., Yi W., Fangqin W., Zheng Z., Zhibing Z. Polyoxometalate-Supported ionic liquid@core-shell polymer nanoparticles: novel pickering interfacial catalysts for efficient and safe epoxidation of allyl chloride with low-concentration H2O2. ACS Sustainable Chemistry & Еngineering. - 2023. - №11(35). – P. 12934-12945. URL: https://doi.org/10.1021/acssuschemeng. 3c02023
2. Гайдаш І.С., Шабельник О.І., Гайдаш І.А., Глазкова Н.О., Фоміна Д.Д. Вплив епіхлоргідрина на кислотну резистентність еритроцитів крові людини in vitro. Світ наукових досліджень. Випуск 24. : матеріали Міжнар. мультидисциплін. наук. інтернет-конф. Ополе : Польща, 21-22 лист. 2023. С. 315-317. http://www.economy-confer.com.ua/full-article/4957/
3. Гайдаш І.С., Шабельник О.І., Гайдаш І.А., Янчевський О.В. Вплив епіхлоргідрина на перекисне окислення ліпідів в еритроцитах крові людини in vitro. Світ наукових досліджень. Випуск 25. : матеріали Міжнар. мультидисциплін. наук. інтернет-конф. Ополе : Польща, 14-15 груд. 2023. С. 264-266. http://www.economy-confer.com.ua/full-article/5110/
4. Vlasenko N. Erythrocyte resistance during blood loss and its correction with synthetic antioxidant. Actual Problems of the Modern Medicine: Bulletin of Ukrainian Medical Stomatological Academy. – 2023. – №2(2). – С. 12-16. URL: https://doi.org/10.31718/2077-1096.23.2.2.12
|